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肠球菌厌氧菌株感染导致犊牛腹泻的诊治
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作者
韩文儒 武守艳 杨丽华 董春光
韩一超 陈剑波 邱建东
山西省农业科学院畜牧兽医研究所
太原市动物卫生监督所
年3月上旬,山西省晋中市某奶牛场新生犊牛先后发病,症状主要为持续腹泻?白色水便,诊断为屎肠球菌和粪肠球菌厌氧菌株感染引起的肠炎,经治疗取得了良好的效果,现报道如下?
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发病情况
山西省晋中市某奶牛场饲养奶牛多头,其中的20多头犊牛于年3月上旬出现持续性腹泻等肠炎症状?奶牛场主人用氟哌酸?多酶片和肠道保健性药物治疗发病犊牛5~7d,无效,有8头犊牛陆续死亡?
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临床症状
新生犊牛2日龄开始出现腹泻症状,排白色水便,有的水便中带血丝?体温38.9~39.3℃,腹泻严重者不能站立,于5d后死亡?
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病理剖检
病死犊牛心室中有血凝块,心脏肌肉未见变软;右侧肺叶瘀血;肝脏肿大,边缘钝圆,质地变脆;脾脏肿大;真胃鼓气,无实质内容物;肠系膜淋巴结肿大?出血;结肠?直肠出血?
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实验室检验
4.1 血常规检查
对发病犊牛进行血常规检查,结果红细胞数降低，白细胞数、叶状中性粒细胞百分比、杆状中性粒细胞百分比升高?
4.2 病原诊断
用BoviD-4AgTestKit试剂盒诊断牛隐鞭虫?轮状病毒?冠状病毒?大肠杆菌K99四种病原，结果全部呈阴性?
4.3 细菌分离培养
无菌采集肝脏?肠系膜淋巴结?肠道内容物等病料有氧接种于普通琼脂培养基上,37℃培养24h?在接种肠道内容物的琼脂培养基表面长出白色针尖大菌落,而接种肝脏?肠系膜淋巴结病料的琼脂培养基表面48h后未长出菌落?挑取长出的可疑菌落进行革兰氏染色,显微镜下见无芽孢?无荚膜?直径为0.5~1μm的蓝色球菌?
再次将肝脏?肠系膜淋巴结病料无菌接种在MRS培养基上,厌氧环境下37℃培养24h,在MRS培养基上长出灰白色菌落?挑取菌落进行革兰氏染色,显微镜下可见无芽孢?无荚膜?直径为0.5~1μm的蓝色球菌?
4.4 菌种鉴定
厌氧条件下将MRS培养基上的菌种接种到血琼脂培养皿上进行纯培养,37℃培养24h;厌氧配制菌悬液,通过浊度比较仪将菌悬液调到标准浊度值,用移液枪将细菌稀释液?菌悬液加入96孔微平板中,每个微平板测两个菌种,将加好菌悬液的微平板在厌氧条件下置于37℃培养24h后放入读数仪读数?经鉴定菌种为粪肠球菌和屎肠球菌?
4.5 药敏试验（药敏片法）
在厌氧环境中,用一次性灭菌接种环取适量细菌,分别在营养琼脂培养皿边缘相对四点涂菌,以每点开始划线涂菌至培养皿的1/2?然后找到第2点划线至平皿的1/2,依次划线,直至细菌均匀密布于培养皿上?用无菌镊子取药敏片等距离贴于平皿培养基周围一圈并轻按几下?将培养皿置于37℃厌氧培养24h后观察?
结果首选药物为氧氟沙星,其次是庆大霉素；磺胺嘧啶钠低敏；青霉素钠?头孢拉定耐药,不建议使用?
4.6 致病性试验
将20只体重在25~30g的昆明系小鼠随机分为2组,第1组10只小鼠腹腔注射分离菌30亿/只,第2组设为对照组,10只小白鼠腹腔注射生理盐水0.2mL/只?结果第1组小鼠接种2h后均出现被毛粗乱?扎堆?精神沉郁等症状,部分小鼠接种5h后出现呼吸急促,8h后出现神经症状,四肢呈游走状,15h后发生死亡,此后接种的小白鼠陆续死亡;4d后不再有小白鼠死亡,共死亡7只,死亡率为70%?死亡小白鼠眼角有脓性分泌物,尾部和四肢末端发绀,肛门周围粘有粪便和垫料,推断小白鼠死前有腹泻的症状，与临床病例症状一致?剖检可见皮下呈弥漫性出血;肝脏肿大,质地变脆;脾脏肿大;肺脏瘀血?有的小白鼠胸腔积液?第2组小鼠精神状况正常,食欲?活动正常,粪便正常,一切体征正常?
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防治
治疗原则:抗菌消炎?预防脱水?纠正酸中毒?
抗生素注射治疗和预防胃肠道继发感染,1%氧氟沙星注射液,按体重0.5mL/kg加入到mL生理盐水中静脉注射,每天2次,连用3~5d?10%樟脑磺酸钠注射液10mL加入到mL生理盐水中静脉注射,每天1次,连用3~5d?25%维生素C注射液20mL?5%维生素B6注射液6mL加入到mL的5%葡萄糖注射液中静脉注射,每天2次,连用3~5d?犊牛吃奶前给母牛乳房消毒,然后用清水清洗;牛舍环境严格消毒,及时清理排泄物;饮水中添加电解多维;发现病牛立即隔离?
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小结与讨论
1）犊牛用药3d后临床症状普遍减轻,用药7d左右基本痊愈,并通过环境消毒及加强饲养管理控制了本病的继续蔓延?
2）初生犊牛免疫力低下,气候骤变?寒冷潮湿?营养缺乏?饲养管理和卫生条件不良等因素常促使本病发生与流行?故加强饲养管理?搞好环境卫生?减少应激是预防本病的关键?
3）本次药敏试验结果表明分离得到的粪肠球菌和屎肠球菌均对氧氟沙星高敏,且实际生产中按药品说明使用氧氟沙星控制了本次发病?但是牛场兽医前期用诺氟沙星（氟哌酸）没有控制发病,而氧氟沙星同诺氟沙星同属喹诺酮类药物?分析其原因,通过咨询牛场兽医,发现牛场前期用药没有按照药物使用说明书规范使用,存在用药量不足?用药时间不够和频繁换药的情况?故在选择药物和应用药物时,一定要进行药物敏感性试验,要规范用药?
来 源
《黑龙江畜牧兽医》年第12期（下）第-页《肠球菌厌氧菌株感染导致犊牛腹泻的诊治报告》
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寇玉红编辑排版
王洁审核
朱海虹
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