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附录二寄生虫病实验诊断技术3分子生
附录二寄生虫病实验诊断技术第三节分子生物学诊断技术新近发展的分子生物学诊断技术即基因和核酸诊断技术,在寄生虫病的诊断中显示了高度的敏感性和特异性,同时具有早期诊断和确定现症感染等优点。本项技术主要包括DNA探针(DNAprobe)和聚合酶链反应(polymerasechainreaction,PCR)两种技术。一、DNA探针技术DNA探针(或称基因探针)是指用同位素、生物素、酶或其他半抗原标记的特定DNA片段。在其与DNA样本杂交过程中,借助上述标记物可探查出特异性或差异性DNA。双链DNA的变性和复性特点是本技术的基础。经加热,或在强酸、强碱作用下,双链DNA氢键被破坏,双股链分离,变成单链(此即变性);而当条件缓慢变为中性或温度下降(50℃左右)时,氢键恢复,分开的两股单链又重新合为互补的双链结构(此即复性)。DNA探针分子杂交就是将样本DNA分子经上述条件处理后,使其变性为单链状态,固定在载体硝酸纤维膜上,再与经小分子标记的DNA探针单链分子混合,在一定条件下使它们互补杂交结合。将未杂交的成分洗脱后,标记物显色,即可观察结果。目前,DNA探针已用于疟原虫、隐孢子虫、贾第虫、锥虫、巴贝斯虫、弓形虫、丝虫、血吸虫、棘球蚴、猪带绦虫、肝片吸虫和猪囊虫等虫种的鉴定和相应疾病的诊断。基因芯片技术(genechip)是20世纪90年代由基因探针技术发展而来的一项新技术。它将集成电路、计算机、半导体、激光共聚焦扫描、荧光标记探针等技术结合为一体,使众多的寡核苷酸探针有规律地排列在硅片上(探针密度可达/cm2),用其可与带有荧光标记的DNA样品杂交,再通过计算机分析荧光信号获得待测DNA样品的序列信息。基因芯片技术大大提高了基因探针的检测效率。在寄生虫学领域,本技术还处于研究之中,目前线虫基因组芯片业已问世。二、PCR技术PCR是在引物介导下特异性扩增DNA的一种技术。它包括模板DNA热变性解链-引物与模板DNA退火-引物延伸3个步骤的循环过程。其基本原理是在实验条件下,根据温度的变化控制DNA解链和退火(引物与模板DNA结合),在引物启动和DNA聚合酶催化下,合成二引物特定区域内的DNA链。上述“解链-退火-延伸”3个连续步骤为一个循环。经过20~30个循环反应,可使引物特定区段的DNA量增加至少倍。此外,PCR具有特异性强、敏感性高、操作简便、快速、样品处理简单等优点。反应过程可在PCR仪内自动进行。除常规PCR外,还有诸如RT-PCR、巢氏PCR、复合PCR、非对称PCR和免疫PCR等多种PCR技术。目前,PCR技术多用于寄生虫病的基因诊断,分子流行病学研究和种株鉴定、分析等领域。已应用的虫种包括利什曼原虫、疟原虫、弓形虫、阿米巴、巴贝氏虫、旋毛虫、锥虫、隐孢子虫、贾第虫、猪带绦虫和丝虫等。(诸欣平卢思奇)(文献资料源自全国高等学校教材《人体寄生虫学》第七版,李雍龙主编,年人民卫生出版社。)
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目录
第一篇总论第一章引言第一节寄生虫对人类的危害第二节我国寄生虫病的现状及存在的问题第三节正在出现的寄生虫病第四节寄生虫学的研究与发展方向第二章寄生虫的生物学
第一节寄生关系及其演化第二节寄生虫生活史、寄生虫与宿主类型第三节寄生虫的营养与代谢第四节寄生虫的生殖潜能第五节寄生虫的分类系统第三章寄生虫与宿主的相互关系及寄生虫感染的特点
第四章寄生虫感染的免疫
第五章寄生虫病的流行与防制
第一节寄生虫病流行的环节
第二节影响寄生虫病流行的因素
第三节寄生虫病流行的特点
第四节寄生虫病的防治原则
第二篇医学原虫学第六章医学原虫概论
第七章叶足虫
第一节溶组织内阿米巴
第二节其他消化道阿米巴
一、迪斯帕内阿米巴
二、结肠内阿米巴三、哈门氏内阿米巴四、微小内蜒阿米巴五、布氏嗜碘阿米巴六、齿龈内阿米巴第三节致病性自由生活阿米巴
第八章鞭毛虫
第一节杜氏利什曼原虫
第二节锥虫
第三节蓝氏贾第鞭毛虫
第四节阴道毛滴虫
第五节其他毛滴虫
一、人毛滴虫
二、口腔毛滴虫第九章孢子虫
第一节疟原虫
第二节刚地弓形虫
第三节隐孢子虫
第四节其他孢子虫
一、肉孢子虫二、贝氏等孢球虫三、微孢子虫四、人芽囊原虫第十章纤毛虫
结肠小袋纤毛虫
第三篇医学蠕虫学第十一章吸虫
第一节概论
第二节华支睾吸虫
第三节布氏姜片吸虫
第四节肝片形吸虫
第五节并殖吸虫
第六节裂体吸虫(血吸虫)
第七节其他人体寄生吸虫
一、异形吸虫
二、棘口吸虫三、徐氏拟裸茎吸虫第十二章绦虫
第一节概论
第二节曼氏迭宫绦虫
第三节阔节裂头绦虫
第四节链状带绦虫
第五节肥胖带绦虫
第六节亚洲牛带绦虫
第七节微小膜壳绦虫
第八节缩小膜壳绦虫
第九节细粒棘球绦虫
第十节多房棘球绦虫
第十一节犬复孔绦虫
第十二节其他人体寄生绦虫
一、西里伯瑞列绦虫二、克氏假裸头绦虫三、司氏伯特绦虫四、巨颈带绦虫和水泡带绦虫第十三章线虫
第一节概论
第二节似蚓蛔线虫
第三节毛首鞭形线虫
第四节蠕形住肠线虫
第五节十二指肠钩口线虫和美洲板口线虫
第六节粪类圆线虫
第七节旋毛形线虫
第八节丝虫
一、班氏吴策线虫和马来布鲁线虫二、旋盘尾丝虫三、罗阿罗阿丝虫第九节广州管圆线虫
第十节其他寄生人体的线虫(1-5)
一、东方毛圆线虫二、美丽筒线虫三、结膜吸吮线虫四、棘颚口线虫五、艾氏小杆线虫第十节其他寄生人体的线虫(6-10)六、兽比翼线虫
七、麦地那龙线虫
八、肾膨结线虫
九、肝毛细线虫
十、异尖线虫
第十四章猪巨吻棘头虫
附录水蛭
第四篇医学节肢动物第十五章概论
第一节节肢动物的主要类群第二节医学节肢动物对人体的危害第三节医学节肢动物的防制第十六章昆虫纲概述第一节蚊第二节白蛉
第三节蠓
第四节蚋
第五节虻
第六节蝇
第七节蚤
第八节虱
第九节臭虫
第十节蜚蠊
第十一节毒隐翅虫
第十七章蛛形纲
引言
第一节蜱
第二节革螨
第三节恙螨
第四节蠕形螨
第五节疥螨
第六节尘螨
附录一
突发公共卫生事件中寄生虫感染的应急处理
附录二
寄生虫病实验诊断技术
第一节病原学诊断技术
一、粪便检查
二、血液检查
三、排泄物与分泌物的检查
四、其他器官组织检查
第二节免疫学诊断技术
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